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改良富血小板血浆对骨髓间充质干细胞增殖与免疫原性的作用
发布日期: 2018-11-3  来源: 华夏康宁  浏览次数: 1401 次

  改良富血小板血浆血小板计数 全血中血小板浓度为187×109 L-1,改良富血小板血浆血小板浓度为    1 001×109 L-1,为全血浓度的5.35倍。

  人骨髓间充质干细胞生长和纯化情况 人骨髓间充质干细胞培养48 h后可见少量细胞贴壁,细胞呈梭形,培养10 d后细胞增生为成纤维样细胞,有少许不规则突触,呈团簇状生长。约2周后细胞达到80%左右融合,连续培养至第3代时细胞形态较均一,呈长梭形,胞核居中。

  人骨髓间充质干细胞鉴定结果

  成骨诱导和染色:换成骨诱导液1周后可见局部细胞密度明显增高,2周后镜下可见圆形、椭圆形反光物质,并逐渐增大。3周后茜素红染色可见红色矿化结节。

  流式细胞术鉴定:人骨髓间充质干细胞CD44+表达率为97.68%,CD105+表达率为97.07%,而CD34表达为阴性。

  成脂诱导和染色:换成脂诱导液1周后可见细胞形态较之前饱满,镜下可见胞浆内有串珠状圆形小泡。2周后油红染色可见胞浆内含有橙红色融合脂滴。

  改良富血小板血浆对骨髓间充质干细胞生长的影响 5%-10%的改良富血小板血浆在培养第6,8天均显著促进了骨髓间充质干细胞的增殖,其中以10%浓度组尤为显著,与其他浓度相比,差异有显著性意义(P < 0.05)。10%的富血小板血浆在培养第10天仍显著促进了骨髓间充质干细胞的增殖。不同浓度改良富血小板血浆培养的骨髓间充质干细胞生长曲线见图8。

  流式细胞术鉴定人骨髓间充质干细胞表面Stro-1表达 在含10%富血小板血浆的α-MEN培养液连续3代培养后,测定细胞表面Stro-1表达显著高于对照组(P=0.000)。

 


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